Актер театра и кино, режиссер. Народный артист РСФСР (1981).
Родился в Москве. Учился в артиллерийской школе Анжеро-Судженска. Окончил театральную студию при Драматическом театре Калинина. В 1960 году был приглашен в Театр Сатиры, проработал в нем непрерывно до конца своей жизни.
С 60-х годов снимался в кино. Озвучивал мультфильмы.
В последние годы Спартак Мишулин любил, как сам говорил, «возиться на даче», коллекционировал значки, был страстным болельщиком своего тезки — футбольного клуба «Спартак».
— Кроме коллекционирования, еще — футбол? Так ведь, Спартак Васильевич?
— Да, футбол, «Спартак», конечно! Но сейчас я на стадион не хожу, потому что футбол из театрального зрелища превратился в зрелище боев, поджигания, кидания бутылок и стульев. Я не циник, хотя сам иногда употребляю отдельные слова для яркости выражения. Но когда вокруг мат, то смотреть футбол в такой атмосфере мне неприятно. Поэтому я болею теперь у телевизора.